Определение транслокации t(9;22)(q34;q11) BCR/ABL

Флуоресцентная гибридизация in situ, или FISH (фиш) анализ, — это цитогенетический метод для определения участков мутации гена или целой хромосомы. Исследование выявляет как количественные, так и качественные аномалии. Материалами для анализа чаще всего являются образцы крови или костного мозга. Диагностика с использованием FISH и других молекулярных тестов, например ПЦР, основана на выявлении генетических маркеров, которые характерны для тех или иных заболеваний. Данный анализ определяет патологическую перестройку сегментов 9 и 22 хромосом с генетическими мутациями генов BCR и ABL. В норме ген BCR располагается на 11 сегменте длинного плеча (q) 22 хромосомы (22q11), ABL – на 34 сегменте длинного плеча 9 хромосомы (9q34). Экспрессия обоих генов приводит к образованию одноименных белков, которые участвуют в регуляции клеточного цикла. Основной тип мутации, характерный для этих генов и хромосом — транслокация (t) — это патологический обмен участков между непарными хромосомами. В результате этого обмена образуется химерный (нефизиологический) ген BCR-ABL1 и филадельфийская (Ph) хромосома. Данные аномалии чаще всего образуются в таких клетках, как нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, моноциты, макрофаги и B-лимфоциты. Установлено, что ген BCR-ABL кодирует (образует) белок — тирозинкиназа. Этот фермент способствует бесконтрольному росту аномальной клетки за счет ускорения её деления и снижения чувствительности к защитным сигналам, которые запускают запрограммированную гибель мутировавших клеток (апоптоз). Генетические маркеры BCR-ABL1 и Ph-хромосома определяются при следующих заболеваниях: Хронический миелоидный лейкоз (ХМЛ); B-клеточный острый лимфобластный лейкоз; Острый миелоидный лейкоз (редко). Анализ FISH совместно с другими лабораторными тестами и клинической картиной позволяет провести дифференциальный диагноз, то есть определить, какой тип онкологического новообразования представлен у больного. Чаще всего — в 90-95 % случаев — аномалии BCR-ABL и филадельфийская хромосома встречаются у пациентов с ХМЛ и свидетельствуют о благоприятном прогнозе. Хронический миелоидный лейкоз (миелолейкоз, ХМЛ) — онкогематологическое заболевание, которое развивается из одной мутировавшей кроветворной (миелоидной) клетки костного мозга. На данный момент причины, по которым развивается миелолейкоз, не установлены. Однако выявлена тесная взаимосвязь между развитием ХМЛ и следующими факторами: инфекционные заболевания, радиационное облучение и токсинемия — циркуляция в крови большого количества токсинов. К основным клиническим симптомам хронического миелоидного лейкоза относятся: Боль или тяжесть в подреберье; Бледность кожных покровов; Склонность к кровотечениям; Повышение температуры; Слабость, одышка, плохая переносимость физических нагрузок; Резкое снижение веса. Мутация BCR-ABL встречается у 25 % больных с B-клеточным острым лимфобластным лейкозом. В основном этот тип лейкоза протекает у взрослых. Пациенты с данной мутацией относятся к группе высокого риска с неблагоприятным прогнозом. Крайне редко BCR-ABL и Ph-хромосома выявляются при остром миелоидном лейкозе. Данные аномалии свидетельствуют о неблагоприятном прогнозе и зачастую способствуют устойчивости к стандартной химиотерапии. У пациентов с хроническим миелолейкозом аномалиям BCR-ABL и Ph-хромосоме в 20-40 % случаев сопутствуют и другие генетические маркеры, которые также можно обнаружить при помощи FISH-анализа — это: Трисомия 8 хромосомы (с гиперэкспрессией гена C-MYC); Трисомия 22 хромосомы (с кратным увеличением копий гена BCR-ABL); Перестройка гена TP53. Все эти мутации приводят к более агрессивному течению ХМЛ, что делает прогноз менее благоприятным. В случае невозможности проведения ПЦР-теста, FISH-анализ также используют и для оценки эффективности лечения ХМЛ.